(二)MCAO模型制备的操作方法与步骤
1.线栓的制备 选用直径为0.26mm的钓鱼线,用锋利薄刀片将线身垂直截成5cm长的小段,用细砂纸打磨头端棱角,在体视镜下选出头端光滑钝圆、大小一致者。用记号笔在距线栓头端20mm处做一标记,将线栓浸泡消毒后晾干。术前置于无菌生理盐水中备用,线栓临用前浸蘸2.5×1000000U/L肝素钠。
2.术前动物准备 分笼饲养(室温20~23℃,湿度60%~70%),明暗光照12h:12h,适应性饲养1~2d,并按实验动物使用的3R原则给予人道关怀。术前12h禁食,自由饮水。
脑缺血再灌注模型的评价方法主要有以下几种,一种是神经功能评分,另一种是脑梗死体积测量,还有一种是分子生物学检测。神经功能评分是通过对动物的行为和运动能力进行观察和打分,反映脑缺血再灌注损伤对神经功能的影响,常用的评分方法有Bederson评分、Garcia评分、Zeiler评分等。脑梗死体积测量是通过对动物的脑组织进行染色和切片,计算脑梗死区域的面积和体积,反映脑缺血再灌注损伤对脑组织的损害,常用的染色方法有TTC染色、HE染色、Nissl染色等。分子生物学检测是通过对动物的脑组织或血液进行提取和分析,检测脑缺血再灌注损伤相关的基因、蛋白、酶、因子、氧化应激指标等,反映脑缺血再灌注损伤的分子机制和信号通路,常用的检测方法有RT-PCR、Western blot、ELISA、组化等。